金纳米颗粒（Gold nanoparticles，AuNPs）在激动普遍的生物医学应用中发扬了迫切作用，包括分子会诊，靶向药物运送，核酸运送和光热疗法。 AuNPs独到的光学性质，生物相容性特征（举例低毒性，低免疫响应性）以及易于合成，促使它被快速应用到了生物医学商讨中。AuNPs最迫切的特征是其名义等离子共振（surface plasmon resonance，SPR）【MIST-141】彼氏とセックスばかりしていて、いつも赤点取ってる姉（妹）がボクと成績を比べられて親に怒られるのが嫌になった結果…テスト勉強しているボクにエッチな誘惑をしてきて成績を下げさせようとする。，即当AuNPs被用光照耀时发生名义电子的集体泛动。SPR属性取决于AuNPs的大小和时事以及周围的胶体介质。举例，悬浮在水中的13 nm直径的AuNPs的共振峰波长约为520 nm。 AuNPs的SPR特质可用于样品表征，尤其是用于评估悬浮液中AuNPs的浓度，因为左证朗伯比尔定律，样品在共振峰波所长的光密度与浓度关联。
传统测定步骤是使用波长为1 cm的UV-Vis（Ultraviolet Visible Absorption Spectroscopy）分光光度计来测量AuNPs在其SPR波所长的光密度。 可是，这种步骤存在几个瑕疵：一是传统分光光度计的固定光程舍弃了仪器的线性界限。 若是AuNPs样品浓渡过高，使其消光所有超出仪器的线性界限，则需要稀释样品，使其消光度落在分光光度计的线性界限内。由于稀释历程中移液弱点，会加多测量不准确的可能性。另一个瑕疵是传统分光光度计需要大批的样品量（界限从0.5 mL到3 mL），在测量历程中AuNPs若被任何名义说合的部分修饰或随后的纯化中被修饰，齐可能导致无法使用。 Thermo Scientific NanoDrop超微量紫外可见分光光度计不错克服这些瑕疵，因此非常适宜表征AuNPs制剂的SPR光谱测定。该仪器诓骗短而可变的光程（0.03–1.0 mm），因此无需稀释即可进行高浓度AuNPs制剂的测量。此外，NanoDrop One分光光度计使用较小样品量（1-2μL）即可进行样品测量。 因此，商讨东谈主员不错保留其大部分AuNPs制剂以用于卑劣应用。
NanoDrop是超微量紫外/可见分光光度计的第一品牌。翻新的基座联想，使检测历程只需简便的点样、测定和擦抹即可，无需稀释，无需耗材，方便快捷。将实践东谈主员从繁琐的样本稀释和比色杯的清洗责任中自如出来，从压根上篡改了科学家们分析DNA、RNA、卵白及金纳米颗粒等的检测步骤。
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好意思国特拉华大学生物医学工程系的Chintan H. Kapadia等东谈主制备了金纳米颗粒比较了传统分光光度计和NanoDrop One分光光度计在金纳米颗粒定量的分袂。领先，参考Frens（参考文件1）的步骤合成AuNPs，将氯化金（Sigma-Aldrich，St.Louis，MO）溶化在去离子水中，在回流下煮沸；在剧烈搅动下加入柠檬酸钠，溶液响应15分钟，直到神采从浅黄色变为深红色；然后将合成的AuNPs过滤以纯化样品。接下来，使用Zeiss LIBRA 120仪器的透射电子显微镜测量AuNPs的直径，效果标明AuNPs的直径为13nm。传统分光光度法，将AuNPs放在1 cm的比色杯中，用水测基线后在850 nm至450 nm的传统分光光度计上进行扫描，赢得峰值SPR波长（521 nm）处AuNPs的光密度（OD）并使用该值缱绻浓度，其中2.7x108 M-1 cm-1被用作13 nm AuNPs的消光所有。通过缱绻标明运行AuNPs样品的浓度为12 nM。 为了制备各式浓度的样品，12000 xg离心5分钟千里淀AuNPs，然后用水进行系统稀释以制备150 nM至10 nM的样品。 然后使用传统的分光光度计和NanoDrop One分光光度计对这些AuNPs样品的SPR特质进行评估。 传统分光光度法测量高浓度悬浮液中AuNPs的SPR，需要将AuNPs用去离子水稀释100倍。而使用NanoDrop One分光光度计进行分析时不需要稀释，况且在NanoDrop One分光光度计上进行测量，只需取极少省略2 µL样品凯旋加到样品基座上进行测量，随后使用无屑纸进行清洁即可。NanoDrop One分光光度计测得的UV-Vis光谱和SPR峰与AuNPs浓度关联的圭臬弧线如图1和图2。
图1：在Nanonrop One分光光度计上测得的浓度为10 nM至150 nM的13 nm AuNPs的UV-Vis光谱。
图2：NanoDrop One分光光度计测得的521 nm处AuNPs的光密度与已知浓度的线性弧线。泄漏了10 nM至150 nM的大界限内的线性关连，R2值为0.9996，n=3。标明仪器的测量相当精准，因为扫数样品的三次测量的圭臬偏差在每种浓度下均在各自吸光度值的1％之内。
通过测试，Chintan H. Kapadia等东谈主评价：Thermo Scientific NanoDrop One超微量紫外可见分光光度计是一种相当快速，准确的仪器，不错评估直径13nm的AuNPs的浓度，因为它不错可靠地测量SPR光谱，说合朗伯比尔定律来缱绻浓度。 与传统的分光光度计比较，NanoDrop One分光光度计的主要上风在于它需要的样品量较少，并带有易于使用的软件，可进行自界说缱绻。 NanoDrop One分光光度计的高罗致才气和低样品量条目使其相当适宜金纳米颗粒浓度测量。尽管此处仅评估了13 nm的AuNPs，但NanoDrop One分光光度计可用于快速准确地分析各式直径AuNPs的SPR和浓度。
UV-Vis光谱扫描操作智商
1. 在“主页”选拔用户自界说，点击紫外-可见光；2. 若是需要成就检测波长，输入最多40个待检测波长，您也不错在扫描后需要时分再指定，或者不指定；3. 选拔是否需要使用自动化光程调遣和基线革新；4. 取1-2μl空缺检测液点到下基座，放下检测臂（或将空缺检测比色皿插入比色皿架）；5. 点击空缺检测并恭候完成；6. 抬起检测臂，擦抹高下基座（或取下空缺检测比色皿）；7. 取1-2μl待测溶液放手到基座上，放下检测臂点击检测（或将样品比色皿插入比色皿架，点击检测）；8. 检测完成，擦洗高下基座（或取出比色皿）。 效果输出：
关于每个检测的样品，此应用泄漏吸光度光谱和效果摘要。要稽查具体解释，不错在泄漏器上按住样品行泄漏，或者凯旋将所少见据用U盘导出。 负责事项：
1. 使用和待测样品溶液交流的缓冲液作念空缺检测；2. 自动化光程，选拔后允许软件为高浓度样品匹配最好检测光程，幸免样品稀释。取消选拔扫数波长的光程为10mm；3. 基线革新，不错输入指定波长（nm），或者使用默许值750nm。
参考文件1. Frens， G.， Controlled Nucleation for the Regulation of the Particle Size in Monodisperse Gold Suspensions. Nature Physical Science 1973， 241， 20.
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